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合成多肽的切割流程
一，什么是“切割”？
切割是生產多肽中的一個步驟，從化學的角度來說，就是把多肽從樹脂上分離并去掉多肽側鏈和主鏈多余的臨時保護基團。
(以下所有的切割都針對樹脂的處理)
二，切割的前后流程。
1，準備待切割的樹脂
這里只需要樹脂里面的溶劑成分被洗滌掉并充分干燥樹脂，理想狀態(tài)是：像干燥的沙子一樣，不容易占到其它物體的表面，例如瓶子或者紙。
2，切割液的選擇和配置
這方面資料在網上也有很多，針對不同的多肽序列，選擇不同的切割液種類。
這里主要列幾種常見的切割液比例。
1）TFA：H2O=95%：5%、TFA：H2O=97.5%：2.5%
2）TFA：H2O：TIS=95%：2.5%：2.5%
3）三氟乙酸：茴香硫醚：1，2-乙二硫醇：苯酚：水=87.5：5：2.5：2.5：2.5
前兩種適合沒有容易氧化的氨基酸，例如Trp、Cys、Met。第三種都可以使用。
（每1g樹脂加8ml左右的切割液）
3，切割過程
常規(guī)的時間在2.5小時左右，要不停地震蕩，溫度為室溫。
一些非常容易氧化或者變質的多肽，還需要排除容器里面的空氣（用氮氣代替），有時還需要適當降低環(huán)境的溫度，例如0-10℃。
4，抽濾收集濾液
抽濾的方法很多，每個實驗室都有自己的方法，小編主要說下，這是的濾液里面含有被切割下來的多肽和一部分側鏈保護基團。一些不溶于TFA的保護基團，例如Pbf，是一種白色漂浮物，同樹脂一起被過濾掉了。
5，沉淀、離心、洗滌
一般認為這個步驟是最影響收率的一步，處理不好的話，就會損失很多多肽。
1）溶劑：沉淀用的是冰乙醚，這里的冰字是要求乙醚的溫度要很低，例如放置在-20攝氏度的冰箱里面。當然使用常溫的乙醚，也是可以的。
乙醚和濾液的體積比為6：1比較合適。
2）儀器：能達到3000轉每分鐘的離心機
3）方法：在時間允許的情況下，小編建議把濾液往6倍體積的冰乙醚慢慢地滴加，可以用磁力攪拌器攪拌冰乙醚。目標是讓剛加進去的濾液立刻析出多肽。
4）離心：把已經析出，變白的溶液離心即可。
5）洗滌：一般建議洗滌3次，每一次都要把溶液攪拌均勻。
6，抽干、的到粗品肽
離心3次之后的肽，各種側鏈保護基團基本被乙醚洗滌了，這時只要將濕的多肽放到真空釜抽干即可。（別放恒溫箱里面）
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